ジフェニルアミン反応（読み）ジフェニルアミンハンノウ

化学辞典 第2版

ジフェニルアミン反応
ジフェニルアミンハンノウ
diphenylamine reaction

酸化性化合物(過オキシ酸，エーテルの過酸化物，オゾニド，ベンゾキノン，ナフトキノン)，強酸化性窒素化合物(硝酸，亜硝酸エステル，ニトロアミン，ニトロソアミン，アミンオキシド，ジニトロ化合物)などによりジフェニルアミンが酸化され，深藍色，緑色，または青藍色を呈する反応．この反応は，次の2種類に大別される．
(1)ルンゲ試験(Lunge's test)：硝酸イオンの検出法，ジフェニルアミン0.5 g を濃硫酸100 mL に溶解し，水20 mL を加えて調製した試薬2～3 mL を試験管にとり，硝酸試料溶液でジフェニルアミン水溶液の表面を覆うと，2液間の界面に青色環を生成する．この反応はきわめて鋭敏であるが，硝酸イオンのほかでも酸化性化合物があれば発色する．窒素としての検出限界は0.05 ppm である．
(2)ディッシュ反応(Dische's reaction)：2-デオキシペントースの呈色反応．微量の検体を水に溶解し，20％ ジフェニルアミンのアルコール溶液数滴を加え，これに濃硫酸1 mL を加えて沸騰水浴上で10 min 加温すると青色に呈色する(ペントースは緑色)．この反応は，デオキシリボ核酸(DNA)の定量分析に応用される．50～100γのDNAを含む検体に，その2倍容のジフェニルアミン試薬を加え，100 ℃ で10 min 加熱すると青色に呈色する．この呈色はかなり安定で，595 nm に吸収極大をもっている．また，この反応はかなり特異性があり，異種の糖類で同じ波長の吸収をもっているものは少ない．DNAを構成するヌクレオチドのうち，発色に関係するのはプリンデオキシヌクレオチドであって，ピリミジンのヌクレオチドは発色しないか，あるいはごくわずかに発色する．

出典　森北出版「化学辞典（第2版）」

日本大百科全書(ニッポニカ)

ジフェニルアミン反応
じふぇにるあみんはんのう
diphenylamine reaction

糖類の呈色反応の一種。ジフェニルアミンを利用した定性反応と定量反応がある。

(1)硝酸イオンの検出反応　19世紀の末期ドイツのG・ルンゲが考案したのでルンゲ試験ともいう。ジフェニルアミン0.5グラムを100ミリリットルの濃硫酸に溶かし、20ミリリットルの水で薄めた溶液2～3ミリリットルを試験管にとり、その表面に硝酸イオンを含む溶液を静かに流し込むと、2液間の界面に青色の環ができる。硝酸イオンの限界濃度0.2ppm。この反応は鋭敏であるが、亜硝酸イオン、種々の酸化剤、発煙硫酸などでもおこる。

(2)デオキシ核酸の定量　ディッシェ反応ともいう。1930年にディッシェZ. Dische（生没年未詳）により発表された。ジフェニルアミン試薬（再結晶したジフェニルアミン1グラムを100ミリリットルの氷酢酸に溶かし、2.75ミリリットルの濃硫酸を加えたもの）に核酸を含む試料溶液を加えると青色になる。発色するのはプリンヌクレオチドのみで、ピリミジンヌクレオチドは発色しない。溶液の吸収極大595ナノメートルを利用してデオキシ核酸の比色定量を行うことができる。青色は、加水分解で生じたデオキシリボースからδ(デルタ)-ヒドロキシレブリン酸が生成し、ジフェニルアミンと反応するためといわれている。

［務台　潔］

出典　小学館　日本大百科全書(ニッポニカ)